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采用高压灭菌的,升火前应打开放气阀门,当水蒸气大量喷发时,关闭放气阀,加大火力,当压力表盘为0.15帕次放气时开始计时,在此气压下持续4个小时即可停火。当压力表降至0帕时,打开放气阀排气,把压力锅门打开自然降温。采用常用灭菌的,在蒸笼底部一角放一支温度计,升火后温度至100°C时开始计时,维持12个小时后停火,闷上一夜,然后打开蒸。当料温降至40°C时,移入接种袋或接种箱中,然后放入酒精、棉塞、包扎带、气雾消毒盒、火机、接种钩、菌种,菌种用百菌清或5%水浸洗,同时有红、绿、黄等色杂菌的菌种,每四筒料放一包菌种。一切就绪后封闭接种箱,点燃消毒盒20分钟后可实现接种,接种时操作人员预先用75%酒精消毒双手,然后小心伸入接种箱中,从尾部撕开种袋接种,种头接近棉塞处的表皮种 弃之不用。地养室培养,此时培养室温度保持24~30°C,12小时后种子开始萌发吃料,20天后当菌丝长至筒料一半时,把接种端袋口稍稍打开通气培养,菌丝长满后,零星出现原基时,进入菌棚排场管理。
发菌以“井”字形堆叠,高约1m,底部用石块或废木垫空,要求堆内温度控制在20兀以上、28兀以下,晴天中午气温高时应撑膜通风降温。每周将段木上下、内外翻动1次,促进发菌均匀。约经30d,接种穴和树皮下长满菌丝,发菌结束。埋土养菌及子实体发生选排水良好、有水源或树荫下作菌床,畦床宽1.2m,深20cm。将段木横向排放在菌床内,段木间距5cm,以无杂质的细壤土填没段木间隙,而后上面覆2cm的土层。搭荫棚离菌床高60cm,棚上盖稀草帘,外覆薄膜,防止直射光和大雨冲刷。这段时间,减少水分供给,养菌约30d。当段木两端断面上具有黄白色菌丝即进入子实体发生阶段,增加空间的湿度,晴天喷水1~2次,保持土壤湿润。7月初子实体陆续发生。第2年5~7月盛产,第3年仍有子实体产生。
免疫调节作用灵芝抱子在传统中药中用来调节免疫系统已有较长历史.Pan等閔观察灵芝抱子多糖对甲基硝基亚硝基胍(MNNG)诱发胃癌大鼠的免疫性和抗氧化活性的影响发现,给予患胃癌大鼠灵芝抱子多糖后,可以降低血清和胃组织中脂质过氧化产物水平,并使胃癌所致的血清SOD、CAT和GSH-Px水平趋于正常,表明灵芝抱子多糖具有一定的免疫调节作用和抗氧化作用.实验发现,灵芝抱子可以提高ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力,增强SR-BC诱导的小鼠足肿胀,增加溶血空班数等,表明灵芝抱子主要通过作用于免疫细胞增强其活性,从而直接或间接调节机体免疫功能. 抗氧化作用灵芝的抗氧化作用与多糖有关,并与多糖的单糖组成、分子量有较大关系.Heleno等28在对灵芝不同部位多糖的提取中发现,灵芝菌丝体中提取的多糖含量,灵芝抱子中提取的多糖抗氧化活性,其DPPH率为0.15mg/mL,还原能力为0.69mg/mL,均比其他部位提取的多糖抗氧化能力强.Deepalakshmi 实验发现灵芝抱子的乙醇提取物表现出强烈的抗氧化活性,其体外抗氧化活性显示,灵芝抱子的乙醇提取物对ABST、DPPH、OH-、O2-的体外能力均较抗坏血酸低,但相差不大.
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